Q1：无扩增产物或者产物量很少。

A1：(1) 核对引物设计，确认引物的纯度和浓度。

(2) 重复实验，确认反应体系配制、反应程序设置无误。

(3) 增加循环数。

(4) 提高Mg²⁺ 浓度。

(5) 优化退火温度。

(6) 尝试不同的血液用量。

Q2：产物呈现高分子量弥散条带。

A2：(1) 扩增样品电泳检测前离心取上清。

(2) 延伸时间不应超过60 sec/kb。

(3) 优化退火温度。

(4) 尝试不同的血液用量。

(5) 减少总循环数。

(6) 降低引物浓度。

Q3: 产物呈现低分子量分散带。

A3：(1) 扩增样品电泳检测前离心取上清；

(2) 提高退火温度；

(3) 尝试不同的血液用量；

(4) 降低引物浓度；

(5) 减少总循环数；

(6) 重新设计引物。

Q4: 全血扩增引物设计注意事项。

A4：(1) 引物3’端最后一个碱基选择C或G。

(2) 引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配。

(3) 引物3’端尽量避免出现发夹结构。

(4) 引物Tm值控制在60℃-72℃之间（推荐使用软件Primer Premier 5进行计算）。

(5) 引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算。

(6) 引物GC含量控制在40%-60%之间。

(7) 正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。