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技术文章 |
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Q1:CUT&Tag适用于什么物种?
A1:CUT&Tag Protocol广泛适用于常规哺乳动物细胞的蛋白-DNA互作研究,酵母、植物等细胞可以经过特殊的处理(破除细胞壁或者提取细胞核)来进行实验,操作可以参照CUT&RUN技术的前端处理方式。
Q2:ConA磁珠主要作用是什么?
A2:ConA磁珠是采用刀豆蛋白A包被过的,能与细胞膜上的糖蛋白结合,从而吸附细胞,使细胞处理操作可视化,从而减少在后续实验过程中的细胞的损失。
Q3:TD901与TD902如何选择?
A3:TD901试剂盒提供的是Protein G与Tn5融合的转座子,TD902提供的是Protein A与Tn5融合的转座子,可以直接用于CUT&Tag实验;针对大多数抗体,二者均具有广泛的适用性,但是Protein A对兔来源抗体的亲和力相对较高,Protein G对于小鼠等部分哺乳动物抗体的亲和力较高,请根据抗体来源种属与Protein A或者Protein G的亲和能力进行选择。
Q4:CUT&Tag是不是只能用Illumina平台测序?
A4:TD901和TD902提供的转座子是针对Illumina平台定向设计的,如果需要使用其他测序平台,可以使用Vazyme #S602和#S603,更换适配相应平台的接头和Index扩增引物即可。